使用Invitrogen轉染試劑需要注意什么？
更新時間：2022-09-13 點擊次數：1678
Invitrogen轉染試劑在細胞轉染、細胞識別、抗體蛋白研發等領域廣泛使用，通常可以直接購買或者過實驗室中DIY配制。Lipofectamine、fugene、磷酸鈣、是較為常見的轉染試劑，其實目前市場上的轉染試劑盒針對某些轉染進行了優化，使用起來較為方便。
由于省掉了電轉杯，轉染過程也更為簡化：只需將細胞和核酸吸入Neon移液器吸頭中，再插入到移液器吸頭架上，并按“Start”即可。轉染過后，直接將細胞加入培養容器中。既沒有繁瑣的移液，也不需要清洗電轉杯。而且，通用的試劑盒適用于所有細胞類型，不用購買多個試劑盒，也無需鑒定最佳緩沖液。當然，一次性使用的24K金電極吸頭成本不低。因多次使用會導致金包被變薄，改變吸頭的電導率，所以每個吸頭最多只能使用兩次。
使用Invitrogen轉染試劑需要注意什么？
1、轉染操作時，以細胞融合度達90%-95%為佳；
2、使用高純度的DNA有助于獲得較高的轉染效率；
3、制備轉染復合物時要求用無血清培養基稀釋DNA和轉染試劑；
4、轉染的時候培養基中不能添加抗生素；
5、試劑應該在4度保存，要注意避免多次反復長時間開蓋；
6、初次使用應優化DNA濃度和陽離子脂質體試劑量以得到最大的轉染效率。DNA和轉染試劑的比例，通常推薦是1:2-1:3。
轉染后需要進行終止嗎？
不需要。脂質體復合物可以穩定存在6個小時。如果在進行轉染前沒有進行細胞換液，為了保證細胞正常生長所需的營養，需要在4～6小時后換用新的培養基。但如果轉染之前已進行過換液，則在脂質體轉染后不需要進行再次換液。
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