在微量和比色皿模式之間進行選擇取決于幾個因素：

• 樣品類型：是 DNA 樣品、蛋白質(zhì)還是其他材料？

• 樣品溶劑：使用的溶劑是什么（例如水、有機溶劑）？

• 樣品濃度：是預期濃度高，還是樣品接近檢測限？

• 可用體積：有多少樣品可用于分析？

何時使用微量

微量紫外-可見光測量已成為核酸定量和蛋白質(zhì)分析的標準，特別是在處理小體積和高濃度時。常見的工作流程，如離心柱迷你制備，產(chǎn)生的 DNA 濃度在微量分光光度計的動態(tài)范圍內(nèi)（例如，DS 系列儀器上的 dsDNA 為 0.75 ng/μL 至 37,500 ng/μL）。

主要優(yōu)點：

• 樣品保存：僅需要 1 μL，其余部分保留用于下游應用。

• 無需稀釋：消除連續(xù)稀釋和移液不一致造成的錯誤。

• 自動路徑長度選擇：SmartPath™ 等技術(shù)會自動優(yōu)化路徑長度。

• 簡單清理：快速擦拭即可去除樣品，降低污染風險。

微量模式特別有利于測量水基溶液，這些溶液由于表面張力而保持完整性并緩慢蒸發(fā)，支持準確定量。

如果您的樣品量有限或您正在進行常規(guī) DNA 定量，微量紫外可見光通常被選。

什么時候應該使用比色皿？

雖然微量測量已成為許多樣品類型的常規(guī)，但傳統(tǒng)的比色皿仍然可用于某些測定。

• 揮發(fā)性溶劑中的樣品：比色皿是一個大部分封閉的容器，可以減緩有機溶劑的蒸發(fā)，有助于保持樣品體積并在測量揮發(fā)性樣品時提高準確性。

• 微生物樣品的 OD600 測量：用戶可以利用比色皿較長的 10 毫米光程來執(zhí)行精確的光散射測量，例如細菌或酵母樣品的 OD600 評估。

• 動力學測定：當您需要監(jiān)測吸光度隨時間的變化時，例如酶反應，比色皿的較大體積和受控環(huán)境可以實現(xiàn)穩(wěn)定、連續(xù)的測量。

為什么使用微量模式進行樣品測量？

改用微體積紫外-可見光測量的好處很多：

• 樣品保存：僅使用 1 uL 樣品進行質(zhì)量控制測量，可保留更多的樣品量以進行額外的 QC 評估，并使更多的樣品可用于終點分析。

• 消除樣品稀釋：在引入微量紫外-可見光測量之前，用戶通常會對樣品濃度做出有根據(jù)的猜測，或者可能會準備一些樣品稀釋液以確保吸光度落在固定光程的線性范圍內(nèi)。如果樣品對于比色皿光程來說濃度過高，用戶將獲得不準確的吸光度測量結(jié)果。無需樣品稀釋還可以減少因移液不正確的體積或未在連續(xù)稀釋的樣品中分配整個體積而產(chǎn)生的額外錯誤。

• 多種光程可優(yōu)化任何樣品：DS 系列分光光度計等儀器上的微量模式使用 SmartPath™ 技術(shù)。這會自動為每次測量選擇正確的光程，使其能夠處理廣泛的濃度（例如，dsDNA 為 0.75 ng/μL 至 37,500 ng/μL）。

• 易于清理：微量測量后取出樣品很簡單——只需用干凈、干燥的實驗室濕巾擦拭即可。比色皿的清潔更耗時，需要清洗和干燥以避免污染。一次性比色皿避免了這種情況，但會帶來財務和環(huán)境成本。