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簡要描述：內(nèi)切β1，4葡聚糖酶（Cx）測試盒 內(nèi)切-β-1，4-葡聚糖酶（Cx）活性測定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。
產(chǎn)品型號：廠商性質(zhì)：代理商更新時間：2024-05-06訪 問 量：930詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
共價結(jié)合型果膠（CSP）含量測試盒
微量法 100管/48樣
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
Cx（EC3.2.1.4）存在于細菌、真菌和動物體內(nèi)，是纖維素酶系的組份之一，Cx主要作用于非晶態(tài)纖維素和水溶性纖維素衍生物，隨機水解糖苷鍵，將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。
測定原理：
采用3,5－二硝基水楊酸法測定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
需自備的儀器和用品：
酶標(biāo)儀/可見分光光度計、水浴鍋、離心機、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體6mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體25mL×1瓶，4℃保存；
樣品測定的準(zhǔn)備：
1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）：
試劑名稱（μL） | 測定管 | 對照管 |
樣本 | 10 | 10 |
試劑一 | 100 | |
蒸餾水 | 100 |
混勻，37℃準(zhǔn)確水浴2h
試劑二 | 200 | 200 |
混勻， 90℃水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻后，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，測540nm下吸光值A(chǔ)，計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。
Cx活性計算
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 6.4078x - 0.0673；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。
2、血清（漿）Cx活力的計算
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min/mL)= [1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷V樣÷T
=14.305×(ΔA+0.0673)
3、細胞、細菌和組織中Cx活力的計算
（1）按照蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min/mg prot)=[ [1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
（3）按細菌或細胞密度計算
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min /104 cell)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T
=0.0286×(ΔA+0.0673)
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.11mL； V樣：加入樣本體積，0.01 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，120 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500萬。
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 3.2039x - 0.0673；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。
2、血清（漿）Cx活力的計算
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min/mL)= [1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷V樣÷T
=28.61×(ΔA+0.0673)
3、細胞、細菌和組織中Cx活力的計算
（1）按照蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min/mg prot)=[ [1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T
=28.61×(ΔA+0.0673) ÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W
（3）按細菌或細胞密度計算
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
Cx活力(μg /min /104 cell)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反總]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T
=0.057×(ΔA+0.0673)
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.11mL； V樣：加入樣本體積，0.01 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，120 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500萬。
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國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。
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