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詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
植物原花青素（OPC）測試盒
微量法100T/48S
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
原花青素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一類黃烷醇單體及其聚合體的多酚化合物，廣泛存在于植物的各種器官中，具有強的抗氧化性和清除自由基的作用，廣泛的應用于醫藥，食品，化妝品，保健品行業。
測定原理:
在酸性條件下，植物原花青素A環上的間苯二酚和間苯三*與香草醛發生縮合反應，產生有色化合物，在500nm處有特征吸收峰，測定500nm光吸收值，可計算植物中原花青素的含量。
自備實驗用品及儀器:
天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水、鹽酸、無水乙醇和甲醇。
試劑組成和配制:
提取液：60%乙醇，自備，4℃保存。（60mL無水乙醇溶于40mL蒸餾水）
試劑一：8%鹽酸10mL，自備，4℃保存。（800μL鹽酸溶于9.2mL甲醇）
試劑二：粉劑0.1g×1瓶，4℃避光保存，臨用前加10mL甲醇溶解。
測定工作液：臨用前按照用量將試劑一和試劑二按照1:1混合。
空白工作液：臨用前按照用量將試劑一和甲醇按照1:1混合。
OPC提取:
稱取約0.1g樣本，加入2mL提取液，勻漿后，60℃振蕩提取2h， 10000g，25℃，離心10min，取上清待測。
測定操作表:
分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長至500nm，蒸餾水調零。
操作表
對照管 | 測定管 | |
樣本（μL） | 40 | 40 |
測定工作液（μL） | 160 | |
空白工作液（μL） | 160 | |
混勻，30℃水浴30min，于微量石英比色皿/96孔板中檢測500nm處吸光值，ΔA=A測定-A對照，每個測定管設一個對照管。 | ||
OPC計算公式:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y=0.0194x+0.0006，R2=0.999
OPC含量（mg/g 鮮重）= (ΔA-0.0006）÷0.0194×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 0.515×(ΔA-0.0006）÷W
V樣總：加入提取液體積，2mL； V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應中樣品體積，0.04mL；W：樣品質量，g
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y=0.0097x+0.0006，R2=0.999
OPC含量（mg/g 鮮重）= (ΔA-0.0006）÷0.0097×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 1.03×(ΔA-0.0006）÷W
V樣總：加入提取液體積，2mL； V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應中樣品體積，0.04mL；W：樣品質量，g
注意事項：
1、配制好的試劑二應盡快使用，4℃保存時間不超過一個月。
2、吸光度變化應該控制在0.01～0.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計算公式中參與計算的稀釋倍數要相應改變。
3、*低檢出限為10μg/g。
上海牧榮生物科技有限公司
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