您好！歡迎訪問上海牧榮生物科技有限公司網(wǎng)站！
咨詢熱線
17621170138
17621170138
簡要描述：葡萄糖6磷酸酶（G6P)測試盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務。
產(chǎn)品型號：廠商性質(zhì)：代理商更新時間：2024-05-08訪 問 量：644詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
葡萄糖6磷酸酶（G6P)測試盒
微量法 100管/96樣
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose 6 phosphatase，G6Pase，EC 3.1.3.9）廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保證血糖的動態(tài)平衡方面起著重要的作用。
測定原理：
G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖，變旋酶和葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NAD+還原生成NADH，在340nm下測定NADH生成速率，即可反映G6P活性。
需自備的儀器和用品：
分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體19 mL×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存；
試劑三：粉劑×1支，-20℃保存；
試劑四：試劑×1支，-20℃保存；
樣本的前處理：
1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
工作液的配制：臨用前將試劑二、試劑三和試劑四轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
將工作液置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱5分鐘。
在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本和190μL工作液，立即混勻，記錄340nm處初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2，計算ΔA=A2-A1。
注意：在該試劑盒中，若ΔA大于0.3，需將樣本用提取液稀釋適當倍數(shù)后測定，使ΔA小于0.3可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。
G6P活性計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、血清（漿）G6P活力計算
單位定義：每毫升血清（漿）每分鐘生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/mL））＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=1608×ΔA
2、組織、細菌或細胞中G6P活力計算
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=1608×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位定義：每g組織每分鐘生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總)÷T=1608×ΔA÷W
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA
V反總：反應體系總體積，1×10-3 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500萬。
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、血清（漿）G6P活力計算
單位定義：每毫升血清（漿）每分鐘生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/mL））＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=3216×ΔA
2、組織、細菌或細胞中G6P活力計算
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=3216×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位定義：每g組織每分鐘生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總)÷T=3216×ΔA÷W
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位定義：每1萬個細胞或細胞每分鐘生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
G6P（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=6.43×ΔA
V反總：反應體系總體積，2×10-4 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V樣：加入樣本體積，0.01 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500萬。
上海牧榮生物科技有限公司
國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。
國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。
提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。
進出口貨物代理服務。
公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
質(zhì)量保證，所有產(chǎn)品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源，加強網(wǎng)絡建設，提高公司內(nèi)部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務。
公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價格。
葡萄糖6磷酸酶（G6P)測試盒
產(chǎn)品咨詢
掃一掃，關注微信
當前位置：