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詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
通用型 ECL 顯色試劑盒
增強型 ECL 化學發光檢測試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶（HRP）的抗體及其關聯的抗原。其原理是，蛋白質或核酸在電泳后轉移到印跡膜上，以一抗及 HRP 標記的二抗結合膜上的目的蛋白，或以HRP 標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產品配制的 ECL 工作液，室溫孵育膜數分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于 X 光片曝光暗盒。然后轉入暗室將 X 光膠片壓在膜上曝光數秒到數小時，顯影定影后蛋白質或核酸條帶可清晰顯示在 X 光膠片上。
產品組分
A 液
B 液
運輸與保存方法
常溫運輸。頻繁使用可置于室溫保存，一年穩定；長期不用，建議置于 4 oC 保存延長效期。【注】：A 液需避光保存！
操作方法（以 X 光膠片為例）
1. 執行常規電泳、轉膜、HRP 標記抗體或者 HRP 標記核酸探針孵育、洗膜。【注】：ECL 發光液是 HRP 的顯色底物，因此檢測系統最終必須基于 HRP 酶標記抗體或者核酸探針。
2. 最后 1 次洗膜的同時，新鮮配制發光工作液（推薦 100-200 μL 發光液/cm2 膜）：分別取等體積的 A 液和B 液，混勻備用。【注】：取 A 液和 B 液一定要用不同的槍頭；另建議立即使用工作液，室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。
3. 用平頭鑷取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液，勿使膜全干燥。用移液器將工作液加到膜上，使之充分接觸。室溫孵育 1-2 min，準備立即壓片曝光。4. 用平頭鑷子夾起膜，膜的下緣輕輕接觸吸水紙，去除膜上多余液體，留下少量工作液，不可讓膜全干燥。
5. 在 X 光膠片暗盒內表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將印跡膜貼在保鮮膜上，將保鮮膜折起來全包裹印跡膜，去除氣泡和皺褶，可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發光工作液。用膠帶將覆蓋印跡膜的保鮮膜固定在暗盒內，蛋白帶面向上。
6. 暗房內取一張 X 光膠片至于包裹的膜上，壓片，曝光 30 sec-2 min，顯影定影沖洗。【注】：曝光時間需根據曝光強度做相應的調整。若是背景過高，可使用兩張 X 光膠片同時壓片。
曝光方法
使用 CCD 拍照：可以將膜放置于工作液中，開機后按照使用說明，將膜取出，進行拍照。另外，也可以根據情況，調整機器測量參數，提高信噪比。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）轉膜、封閉、孵育都需要避免氣泡，另外戴手套可以避免在膜上留下手印，保持膜的干凈。
3）長時間曝光或蛋白過量，將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。曝光不足則條帶模糊。
4）某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光，應選擇高質量保鮮膜
5）避免將多張膜置于同一個洗膜盒內洗膜，相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。
6）使用肉眼可見的預染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小。
7）使用生物素-親和素系統，避免使用牛奶封閉，可能會導致背景過高。
8）金屬氧化物顆粒可能會造成膜上出現顆粒狀斑點，避免使用帶有銹跡的剪刀以及鑷子，建議使用塑料的平頭鑷子。
9）疊氮*鈉（NaN3）能抑制 HRP 活性，若回收 HRP 標記探針或者抗體應避免使用 NaN3，如必需使用勿超過 0.01%。
10）本品無特殊毒性，按普通化學品處理。11) 本產品僅作科研用途!
問題與解決方案
上海牧榮生物科技有限公司
國內試劑耗材經銷代理。
國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。
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