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簡要描述：總抗氧化能力（FRAP法）測試盒 總抗氧化能力（Total antioxidant capacity，T-AOC）試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產品.為客戶全面解決實驗、生產、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務。
產品型號：廠商性質：代理商更新時間：2024-05-07訪 問 量：667詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥 |
總抗氧化能力（FRAP法）測試盒
微量法100T/96S
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
研究意義：
測定對象中各種抗氧化物質和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學、醫(yī)學和藥學研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液，細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測定原理：
在酸性環(huán)境下，還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產生藍色的Fe2+-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力。
自備實驗用品：
恒溫水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，使用前預冷。
試劑一：液體15mL×1瓶，避光保存。
試劑二：液體1.5mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體1.5mL×1瓶，避光保存。
混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用)：將試劑一、試劑二、試劑三按10:1:1的比例混合，使用前37℃預溫。
樣品的制備：
(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品
血漿（制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝，不宜使用EDTA抗凝）4℃，5000rpm 離心10min，取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定，也可以-80℃凍存（不宜超過30 d）后再測定。
(2) 組織樣品
按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
(3) 細胞樣品
按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎（功率200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
操作步驟：
分光光度計/酶標儀預熱30min，調節(jié)波長至593nm，蒸餾水調零。
操作表
空白管 | 測定管 | |
混合液（μL） | 180 | 180 |
樣品（μL） | 6 | |
雙蒸水（μL） | 24 | 18 |
充分混勻，反應20min，于微量石英比色皿/96孔板，測定593nm吸光值，△A= A測定-A空白 | ||
注意：空白管只需測定一次。
總抗氧化能力計算公式：
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y=0.8442x-0.0048，R2=0.9979
按樣本質量計算
單位定義：每g樣本每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/g 鮮重）=（△A+0.0048）÷ 0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=59.228×（△A+0.0048）÷W
按樣本蛋白濃度計算
單位定義：每mg蛋白每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/mg prot）=（△A+0.0048）÷0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×Cpr)÷T
=59.228×（△A+0.0048）÷Cpr
按細胞計算
單位定義：每萬個細胞每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/104cell）=（△A+0.0048）÷0.8442×1000×V樣÷（V樣÷V樣總×細胞數(shù)量（萬個））÷T
= 59.228×（△A+0.0048）÷ 細胞數(shù)量（萬個）
按液體體積計算
單位定義：每毫升樣本每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/mL）=（△A+0.0048）÷0.8442×1000÷T
= 59.228×（△A+0.0048）
V樣總：加入提取液體積，1 mL；V樣：反應中樣品體積，6μL；T：反應時間，20min；W：樣品質量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.4221x - 0.0048；R2=0.9979
按樣本質量計算
單位定義：每g樣本每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/g 鮮重）=（△A+0.0048）÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=118.455×（△A+0.0048）÷W
按樣本蛋白濃度計算
單位定義：每mg蛋白每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/mg prot）=（△A+0.0048）÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×Cpr)÷T
=118.455×（△A+0.0048）÷Cpr
按細胞計算
單位定義：每萬個細胞每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/104cell）=（△A+0.0048）÷0.4221×1000×V樣÷（V樣÷V樣總×細胞數(shù)量（萬個））÷T
= 118.455×（△A+0.0048）÷ 細胞數(shù)量（萬個）
按液體體積計算
單位定義：每毫升樣本每分鐘產生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。
總抗氧化能力（U/mL）=（△A+0.0048）÷0.4221×1000÷T
= 118.455×（△A+0.0048）
V樣總：加入提取液體積，1 mL；V樣：反應中樣品體積，6μL；T：反應時間，20min；W：樣品質量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL
注意事項：
試劑二對人體有刺激性，請采取適當?shù)姆雷o措施。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴乳膠手套操作。
盡量避免使用在酸性條件下呈藍色或接近藍色的試劑，否則對本試劑盒的檢測結果產生干擾。
樣品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢劑和DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應的還原劑。
上海牧榮生物科技有限公司
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